一、導言
近日，圣庭醫(yī)療與臺州學院附屬臺州中心醫(yī)院、臺州學院醫(yī)學院腫瘤研究所、臺州學院附屬臺州市醫(yī)院、臺州學院醫(yī)學院藥理學系的聯(lián)合研究發(fā)現(xiàn)，殺傷細胞免疫球蛋白樣受體2DL4（KIR2DL4）的敲低或過度表達可以分別抑制或促進腎細胞癌（RCC）增殖。研究成果在中科院二區(qū)期刊《LIFE SCIENCES 》IF=6.780上發(fā)表，該研究結果有望為尋找潛在的RCC抗癌藥物提供理論基礎。
二、研究內容
本研究納入了TCGA數(shù)據(jù)庫531例RCC的患者，使用了生物信息學分析、免疫組織化學、免疫印跡等技術對KIR2DL4是否由RCC表達及其在RCC進展中的可能作用進行了研究。
三、研究結果
NO.1 KIR2DL4在RCC中過量表達
在本研究中，利用GEPIA在線分析工具進一步分析了不同等級RCC的KIR2DL4 mRNA表達水平，我們發(fā)現(xiàn)KIR2DL4的mRNA表達隨著RCC等級的增加而增加 (圖1a) 。
圖1 KIR2DL4在RCC細胞系中的蛋白表達情況。
GAPDH被用來作為內參。
NO.2 敲低KIR2DL4的表達會降低Caki-1和769-P細胞的細胞活力和細胞系形成
通過轉染KIR2DL4-shRNA敲低KIR2DL4在Caki-1 和769-P細胞中的表達，并檢查其對它們增殖表型的影響。結果如圖2c和3c所示，KIR2DL4敲低可以明顯降低約35% Caki-1和769-P細胞的活力。在細胞周期檢測中，KIR2DL4敲低后約50%~70%的細胞 G1/G0停滯(圖2d和3d) ，這表明KIR2DL4敲低抑制了Caki-1和769-P細胞的細胞系形成。
圖2 KIR2DL4敲低可以減少Caki-1細胞的增殖。
圖3 KIR2DL4敲低可以抑制769-P細胞的增殖，
KIR2DL4敲低對細胞周期分布的影響。
NO.3 KIR2DL4可影響腫瘤相關途徑和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K) /AKT信號途徑
免疫印跡檢測顯示，在KIR2DL4高表達的Caki-1和769-P細胞中，磷酸化的AKT水平被上調 (圖4c) ，而在KIR2DL4敲低的Caki-1細胞中，磷酸化的AKT水平在KIR2DL4被敲低后下降 (圖4d)，這些觀察表明，KIR2DL4可能通過PI3K/AKT途徑促進RCC的進展。
圖4 通過免疫印跡分析KIR2DL4過表達或敲低后的AKT磷酸化水平，GAPDH用作內參。
四、小結與啟發(fā)
在過去的十年中，一些靶向藥物被美國食品和藥物管理局 (FDA)批準用于RCC治療，包括索拉非尼、舒尼替尼、替米羅莫司和Ever-olimus[1-3]。在這個時間框架內，RCC的中位總生存率有了明顯的改善。此外，隨著2015年FDA批準nivolumab用于晚期RCC患者，免疫療法也在重新興起[4-5]?？偟膩碚f，RCC的免疫療法正在獲得研究興趣。
在本研究中，我們的研究結果表明KIR2DL4在RCC細胞中過度表達，而KIR2DL4的敲低或過度表達可以分別抑制或促進RCC細胞增殖。此外，過表達KIR2DL4的Caki-1和769-P細胞的pAKT水平更高，這表明KIR2DL4可能通過PI3K/AKT信號通路促進RCC的進展。基于該研究結果，有望為尋找潛在的RCC抗癌候選藥物提供理論基礎。
參考文獻
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